HEPES буфер: 'невидимый помощник' в обнаружении вируса бешенства
2026-01-22
4-гидроксиэтилпиперазинэтанасульфоническая кислота, сокращенноHEPESна английском языке, имеет номер CAS 7365-45-9. Он представляется в виде белого кристаллического порошка и имеет стабильный диапазон pH между 6,8-8.2Как биологический буферный агент, регулирование pH является его наиболее распространенным применением и пользуется большой популярностью у крупных производителей в области ухода за кожей.его решающую роль в выявлении вируса бешенства мало кто знает, и мы предоставим подробное введение ниже.
Дилемма традиционных методов выявления вируса бешенства
Когда вирус бешенства размножается в инфицированных клетках, он обычно не вызывает цитопатических эффектов (ЦПЭ), и также сложно сформировать бляшки в обычных условиях культуры.Хотя многие ученые в стране и за рубежом успешно установили методы заражения бешенством вирусом на клетках эмбриона курицы и клетках BHK-21Некоторые из них имеют чрезвычайно строгие требования к условиям эксперимента, требующие точного контроля различных факторов, таких как температура, влажность,состав газа, и т. д. Некоторые этапы работы сложны и требуют длительного обучения профессиональных техников, чтобы овладеть ими.что сильно ограничивает продвижение и применение этих методов..
Прорывное применение HEPES в выявлении вирусов бешенства
Исследователи случайно обнаружили, что HEPES может усилить патогенное действие вируса бешенства на инфицированные клетки.Исследователи изобрели простой и быстрый метод нанесения надписей на HEPES для вируса бешенства.
HEPES значительно способствует образованию пятен коррозии
В эксперименте инфицированные клетки культивировали при 37 °C в течение 3-5 дней, а затем одну группу инфицированных клеток лечили HEPES.Очевидные клеточные поражения могут быть четко замечены в нижней части покрытия.Впоследствии была использована кристаллическая фиолетовая окраска, и пятна коррозии были четко видны.В группе инфицированных клеток без лечения HEPES не было ни цитопатических эффектов, ни образования бляшек.Этот экспериментальный результат наглядно демонстрирует, что HEPES оказывает значительное стимулирующее влияние на образование бляшек вируса бешенства на клетках BHK.
Метод гравировки HEPES имеет высокую чувствительность
Анализ бляшек HEPES не только прост в эксплуатации, но и хорошо работает при титрации титров вирусной инфекции.Экспериментальные данные показывают, что между количеством бляшек, образованных после вирусной инфекции и разведением вируса, существует четкая связь титра.В качестве примера мы взяли штамм вируса бешенства CTN-BHK и определили титры инфекции с помощью анализа бляшек HEPES и мыши соответственно.было установлено, что количество бляшек, измеряемых методом HEPES, составляет от 10, 0 × 10 ° до 4, 0 × 10 * PFU/ ml, в то время как титры инфекции, измеренные методом мыши, были в диапазоне от 6, 0 до 6, 8 лог или от 1, 0 × 10 ° до 6, 3 × 10 / ml.Этот результат полностью демонстрирует соответствие чувствительности между методом быстрого HEPES и методом мыши..
Метод гравировки HEPES имеет выдающиеся преимущества
При изучении титрации титра инфекции вирусов бешенства CTN-181 и CTN-BNK,было установлено, что использование HEPES может эффективно индуцировать и усилить патогенное действие вируса бешенства на инфицированные клетки.Специфический метод операции следующий: после вирусной инфекции клеток культивировать при температуре 37 °C в течение 3-5 дней.добавить 50-100 мммоль/л HEPES капельным образом на крышку полутвердой среды метилцеллюлозы, окрасить кристально-фиолетовым раствором через 24 часа и высушить при комнатной температуре, чтобы непосредственно вычислить количество пятен коррозии невооруженным глазом.По сравнению с предыдущими отчетами о методах гравировки, этот метод имеет много преимуществ, таких как скорость, простота, экономичность, чувствительность и легкость освоения.
HEPES, произведенный компанией Desheng, достигает уровня реагента с чистотой более 99%.мы установили отношения сотрудничества со многими производителямиДля удобства клиентов, компания может предоставить бесплатные образцы для испытаний.Если у вас есть какие-либо вопросы или потребности, пожалуйста, нажмите на официальный сайт для получения дополнительной информации или свяжитесь со мной напрямую!
Подробнее