Which buffer Tris or EPPS is suitable for Folin phenol method to detect protein?

Ряд буфера Tris около 6-8, которое соответствующее для большинств биохимических экспериментов, особенно в родственных экспериментах по исследования протеина и нуклеиновой кислоты; EPPS также соответствующее для протеина и нуклеиновой кислоты. Эксперимент по исследования дороже чем Tris, поэтому что соответствующее для метода фенола Folin для того чтобы обнаружить эксперимент по протеина?

Метод реагента Folin-фенола основной метод обыкновенно использовал для того чтобы определить концентрацию протеина и широко был использован в поле биохимии. В практических применениях, EPPS (HEPPS) обычно использовано как буфер для метода фенола Folin для того чтобы обнаружить содержание белка, а не используя буфер Tris.

Буфер Tris и EPPS использован для обнаружения содержания белка

Крася принцип метода фенола Folin для определения содержания белка это же как это из метода биурета (только EPPS не смогите быть использовано для биурета/обнаружения биурета). Разница что добавлен второй реагент, реагент Folin-фенола. Увеличить количество цвета, таким образом улучшая чувствительность обнаруживать протеины. Преимущество метода фенола Folin для обнаруживать содержание белка что оно имеет высокую чувствительность и гораздо более чувствительно чем метод биурета. Конечно, оно также имеет некоторые недостатки что оно принимает долгое время, стандартная кривая не прям, характерность плоха, и больше мешая вещества.

Любая группа которая мешает с биуретовой реакцией, как - CO-NH2, - буфер CH2-NH2, CS-NH2 и Tris, сахароза, сульфат аммония, и сульфогидрильные смеси, может помешать с реакцией Folin-фенола и повлиять на последняя очень большая. К тому же, фенолы и лимонная кислота также помешать с этой реакцией.

реагент Folin-фенола состоит из 2 реагентов. Реагент одно состоит из карбоната натрия, окисоводопода натрия, пентагидрата сульфата меди и тартрата натрия калия. Скрепление пептида в протеине реагирует с решением тартрата меди натрия калия под алкалическими условиями для того чтобы сформировать пурпурн-красный комплекс. Второй реагент составлен фосфорномолибденовой кислоты, фосфорновольфрамовой кислоты, масляной серной кислоты, брома и так далее. Под алкалическими условиями, этот реагент легко уменьшен феноловой группой в составе тирозин в протеине для того чтобы дать голубую реакцию, и своя глубина цвета пропорциональна к содержанию белка. Этот метод также соответствующий для определять содержание тирозина и триптофана. Ряд измерения этого метода протеин 25-250μg.

В сводке, преимущество метода фенола Folin для определять содержание белка высокая чувствительность, но недостаток что он принимает долгое время и мешает. Tris может также причинить взаимодействие. Буфер EPPS должен быть использован. Desheng производит оба из этих буферов, для того чтобы не сказать что лучшее, но быть соответствующий для различных экспириментально исследований.