Which buffer Tris or EPPS is suitable for Folin phenol method to detect protein?

Буферный диапазон Tris составляет около 6-8, что подходит для большинства биохимических экспериментов, особенно в связанных исследовательских экспериментах с белками и нуклеиновыми кислотами;Буфер EPPSИсследовательский эксперимент дороже, чем Трис, так что какой из них подходит для метода фолин-фенола для обнаружения белка эксперимент?

Метод фолин-фенола является основным методом, обычно используемым для определения концентрации белка, и широко используется в области биохимии.EPPS (HEPPS) обычно используется в качестве буфера для метода фолин-фенола для обнаружения содержания белка, вместо того, чтобы использовать буфер Трис.

Для определения содержания белка используются буфер Tris и EPPS.

Принцип окрашивания метода фолина-фенола для определения содержания белка такой же, как и метод биурета (но для обнаружения биурета/биурета не может использоваться EPPS).Разница в том, что второй реагентДля увеличения количества цвета, тем самым улучшая чувствительность обнаружения белков.Преимущество метода фолина-фенола для обнаружения содержания белка заключается в том, что он имеет высокую чувствительность и гораздо более чувствителен, чем метод биурета.Конечно, у него есть и некоторые недостатки, что это занимает много времени, стандартная кривая не прямая, специфичность плохая, и есть больше помешающих веществ.

Любая группа, которая мешает реакции биурета, например -CO-NH2, -CH2-NH2, CS-NH2 и Tris буфер, сахароза, сульфат аммония и сульфидрильные соединения,может влиять на реакцию фолина-фенола и влиять на последнюю гораздо больше.Кроме того, фенолы и лимонная кислота также мешают этой реакции.

Фолин-фенольный реагент состоит из двух реагентов: первый реагент состоит из карбоната натрия, гидроксида натрия, сульфата меди и калия натрия тартрата.Пептидная связь в белке реагирует с раствором калия натрия медного тартрата в щелочных условиях, образуя пурпурно-красный комплексВторой реагент состоит из фосфомолибдиновой кислоты, фосфотонгустовой кислоты, серной кислоты, брома и т.д. При щелочных условияхэтот реагент легко уменьшается фенольной группой тирозина в белке, чтобы получить синюю реакциюЭтот метод также подходит для определения содержания тирозина и триптофана.Диапазон измерений данного метода составляет 25-250μg белка..

Подводя итог, преимущество метода фолин-фенола для определения содержания белка заключается в высокой чувствительности, но недостатком является то, что он занимает много времени и мешает.Трис также может вызвать помехиДешенг производит оба этих препарата.биологические буферы, не для того, чтобы сказать, какой из них лучше, но чтобы быть подходящим для различных экспериментальных исследований.