Различные экзогенные и эндогенные факторы, такие как загрязнители окружающей среды, ионизирующее излучение, химиотерапия лекарственных препаратов и клеточный метаболизм, могут вызвать различные формы повреждения ДНК.Разрывы двойных нитей ДНК наносят наиболее серьезный ущерб стабильности генома и могут угрожать выживанию клетокСоздание простого, быстрого и чувствительного метода обнаружения гибридизации ДНК и эффектов генотоксичности является очень значимой темой исследования.Вот краткое представление о методе обнаружения повреждений ДНК.
Какие виды обнаружения повреждений ДНК
Методы обнаружения повреждения ДНК включают гелевой электрофорез, ультрафиолетовую спектрофотометрию, флуоресценцию и электрохимию и анализ химиолюминесценции.Анализ химиолюминесценции (CL) широко используется в области окружающей среды и наук о жизни из-за его высокой чувствительностиФормальдегид и ацетальдегид являются загрязнителями окружающей среды. До некоторой степени он может вызвать повреждение ДНК.Исследование количества эфиров акридиния, встроенных в ДНК до и после повреждения формальдегида и ацетальдегида, вызывающие изменения интенсивности химиолюминесценции эфиров акридиния, и изучение поведения повреждения формальдегида и ацетальдегида на ДНК.Создать простой метод анализа химиолюминесценции для оценки степени повреждения ДНК, вызванного формальдегидом и ацетальдегидом.
Метод акридиновых эфиров для обнаружения повреждения ДНК в окружающей среде
1Сначала используемую стеклянную люминесцентную ячейку впитывают в определенное количество концентрированной азотной кислоты в течение нескольких часов, закисляют, а затем промывают водой.Добавить 20 мкЛ ДНК тимуса телят 1 мг/мл в кислотную клетку люминесценции, и поместить его в течение 1 часа, чтобы ДНК была адсорбирована на дне светоизлучающего бассейна,а затем неадсорбированная ДНК тимуса молодняка промывается вторичной водой для получения светоизлучающего бассейна с адсорбированной ДНК.
2Добавить 50μL 9,6×10-7 г/мл.эфир акридинияк люминесцентной клетке, и реакция химеризации в течение 1 часа внедряет AE в двойную структуру ДНК, и смывает unchimeric AE с вторичной водой.в люминесцентной ячейке Добавление реагентов инициирования люминесценции в последовательности для обнаружения химилуминесценции, генерируемой AE, химеризированной в ДНКПри обнаружении повреждения ДНК тимуса телят формальдегидом и ацетальдегидом, добавьте реагент повреждения ДНК после химеризации AE и используйте его через определенный период времени.Вторая вода смывает АЭ, выделяемую после повреждения ДНК., и добавляется реагент инициирования люминесценции для обнаружения интенсивности химилюминесценции химерной AE в ДНК.
Исследования показали, что эфир акридиниума может использоваться в качестве индикатора химиолюминесценции с хорошей структурой интеркалирующейся двойной спирали ДНК.Этот метод обнаружения применим для повреждения ДНК и метода обнаружения химиолюминесценции.. Он обладает преимуществами простоты и чувствительности. Исследования повреждений обеспечивают простой метод исследования.тепловая стабильность и высокое соотношение сигнала к шуму, а условия маркировки мягкие, скорость маркировки высокая, и отделение не влияет на отделение после маркировки. , поэтому он считается идеальным химическим маркером.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
