Эстер акридина может обнаружить повреждение ДНК причиненное формальдегидом и ацеталдегидом!

Различное экзогенное и эндогенные факторы, как экологические поллютанты, ионизирующее излучение, химиотерапия лекарства, и метаболизм клетки, могут причинить различные формы повреждения ДНК. Среди их, перерывы двух-стренги ДНК имеют большинств серьезный ущерб к стабильности генома и могут угрожать выживания клеток. Устанавливающ простую, быстрый и чувствительный метод для обнаруживать влияния гибридизации и genotoxicity ДНК очень содержательная тема исследования. Здесь краткое введение к методу обнаружения повреждения ДНК.

Что типы обнаружения повреждения ДНК

Методы обнаружения повреждения ДНК включают спектрофотометрирование электрофореза геля, ультрафиолетов, флуоресцирование и электрохимию, и анализ хемолюминесценции. Анализ хемолюминесценции (CL) широко был использован в полях окружающей среды и наук о жизни должных к своим высокой чувствительности, широкому линейному пробегу, удобной деятельности, быстрому анализу, и легкой автоматизации. Формальдегид и ацеталдегид оба экологических поллютанта. В определенной степени, он может причинить повреждение ДНК. Изучите количество эстеров acridinium врезанных в ДНК перед и после повреждением формальдегида и ацеталдегида, причиняя изменения в интенсивности хемолюминесценции эстеров acridinium, и изучите поведение повреждения формальдегида и ацеталдегида на ДНК. Установите простой метод анализа хемолюминесценции для того чтобы оценить степень повреждения ДНК причиненную формальдегидом и ацеталдегидом.

Метод эстеров акридина для обнаруживать ущерб окружающей среде к ДНК

1. Во-первых, выдержите стеклянную клетку люминесценции используемую в некоторое количество сконцентрированной азотноводородной кислоты на несколько часов, подкислите, и после этого прополощите с водой. Добавьте μL 20 ДНК тимуса икры 1mg/mL к подкисленной клетке люминесценции, и установите его на 1 час для того чтобы сделать ДНК адсорбирует на дне светоизлучающего бассейна, и после этого unadsorbed икра ДНК тимуса помыта с вторичной водой для того чтобы получить светоизлучающий бассейн с ДНК адсорбировала.

2. Добавьте 50μL эстера acridinium 9.6×10-7g/mL к люминисцентной клетке, и реакция chimerization для 1h для того чтобы врезать AE в ДНК двух-села структуру на мель, и моет прочь unchimeric AE с вторичной водой. В конце концов, в люминисцентной клетке добавьте реагенты инициализации люминесценции в последовательности для того чтобы обнаружить хемолюминесценцию произведенную AE chimerized в ДНК. Обнаруживая повреждение ДНК тимуса икры формальдегидом и ацеталдегидом, добавьте реагент повреждения к ДНК после chimerization AE, и используйте его после некоторого периода времени. Вторая вода моет прочь выпущенный AE после того как ДНК повреждена, и добавлены, что обнаруживает реагент инициализации люминесценции интенсивность хемолюминесценции AE химерного в ДНК.

Исследования показывали что эстер acridinium можно использовать как индикатор хемолюминесценции с хорошей структурой вставлять двойную спираль ДНК. Этот метод обнаружения возможен для повреждения перерыва ДНК и метода обнаружения хемолюминесценции. Он имеет преимущества простоты и чувствительности. Исследования повреждения обеспечивают простой метод исследования. Отметки эстера акридина Desheng люминисцентные имеют свойства хорошей гидролизной стабильности, термической стабильности и высокого коэффициента сигнал-шума, и обозначая условия слабы, обозначая тариф высок, и разъединение не влияет на разъединение после обозначать. , Так рассмотрены, что будет идеальной химической отметкой.