ХЭПЭС важная биохимическая подготовка в биохимической индустрии. Рассмотрены, что будет одним из важных буферов в поле биологического исследования. Химическое имя ХЭПЭС является следующим: Кислота Н-хйдроксетхылпиперазине-1-етанесульфоник, характер белый кристаллический порошок, слабая кислота, часто используемая как звиттерионик буфер и фармацевтическое промежуточное звено в органической химической промышленности. Она часто выбрана как буфер для культуры клетки из-за своих преимуществ:
Продукты положения и буфера Дешенг
1. Емкость декомпозиции ХЭПЭС можно увеличить с увеличением температуры и ослаблять с уменшением температуры, но сравненный с другими буферами, своя константа декомпозиции не изменяет много с температурой, которая делает ХЭПЭС буфер стать буфером а которому лучший поддерживает структуру и функцию энзима. Буфер может контролировать постоянн ряд пэ-аш на более длинный период времени и не имеет никакой токсический эффект на клетках.
2. Пэ-аш необходим для большинств клеток 7.2-7.4, ХЭПЭС имеет хорошую емкость буфера в этом ряде, но оптимальное значение пэ-аш меняет с выращиванным в питательной среде: типом клетки. Фиброциты предпочитают более высокий пэ-аш (7.4-7.7), пока субкултуред линии клетки требуют кислотного пэ-аш (7.0-7.4). Большинств культурная среда полагается на гидрокарбонате натрия (НаХКО3) и системе СО2 для амортизировать. Концентрация СО2 в участке газа должна быть сбалансирована с концентрацией гидрокарбоната натрия в культурной среде. В этом случае, крышка бутылки культуры клетки не должна быть привинчена слишком туго для обеспечения обмена газа. Однако, после хранения в течение некоторого времени, пэ-аш системы буфера увеличит с улетучиванием СО2. В это время, решение культуры быстро будет пурпурным когда субкултуред и дунута клетка, делая клетки выращиванные в питательной среде: с этой культурной средой трудным выдержать. Даже если оно выдерживает, работа оно также очень низок, и тариф пролиферации очень медленен. Добавление ХЭПЭС к решению культуры может избежать этой проблемы. ХЭПЭС можно использовать как буфер для замены гидрокарбоната исключить ограничение окружающей среды культуры СО2 высоко-концентрации. Окончательная используемая концентрация буфера ХЭПЭС вообще 10-25мМ.
Как использовать ХЭПЭС:
1. ХЭПЭС можно сразу добавить к подготовленному решению культуры на необходимой концентрации, и после этого простерилизовать фильтрацией. Добавьте 2,38 грамма ХЭПЭС в 1000мл решения культуры, отрегулируйте пэ-аш до 7,2 с НаОХ лН после растворения, фильтруйте и простерилизуйте и используйте в это время, концентрация пользы ХЭПЭС 10 ммол/Л.
2. Его можно также подготовить в решение хранения 100 кс (л мол/Л). Перед использованием, 99мл решения культуры добавлено к решению хранения льмл, и окончательная концентрация применения все еще 10ммол/Л. л метод подготовки запасного раствора мол/Л (100 кс) ХЭПЭС: растворите 23.8г ХЭПЭС в воде двух-дистиллированной 90мл, отрегулируйте пэ-аш до 7.5-8.0 с НаОХ 1Н, тогда разбавьте к 100мл с водой, фильтром и простерилизуйте, и распределите пробирки (2мл/боттле), магазин на 4℃ или -20℃.
Биохимическое Дешенг напомненное что при использовании как буфер для культуры клетки, ХЭПЭС в культурной среде, который подвергли действию видимого света для больше чем 3х произведет перекись водорода которая токсическая к клеткам. Порекомендовано, чтобы культурная среда хранилась в темноте.
