Биологический буфер ТЭС: "Устойчивый хранитель" в области осадков и экстракции ДНК

В молекулярных биологических экспериментах осаждение и экстракция ДНК являются фундаментальными шагами в исследовании генов, технологии клонирования и разработке диагностических реагентов.выборбиологические буферные агентынепосредственно влияет на чистоту, целостность и экспериментальную эффективность ДНК.Триметилметиламиноэтаносульфоновая кислота (Буфер TES), как эффективное буферирующее средство, продемонстрировало значительные преимущества в области манипулирования ДНК благодаря своим уникальным физико-химическим свойствам и стабильности.

Химические свойства ТЭС: научная основа для буферизации

TES, химическое название 2-[ (тригидроксиметил) метиламино] -1-этаносульфоновая кислота,и группы сульфоновой кислоты и многочисленные гидроксильные группы в его молекулярной структуре наделяют его превосходными буферными способностямиПри комнатной температуре значение pKa TES составляет 7.5, а эффективный буферный диапазон охватывает pH 6,8-8.2По сравнению с традиционным буферным Tris (буферный диапазон pH 7,0 - 9,0),TES обладает более сильной устойчивостью к изменениям температуры и может эффективно избежать риска деградации ДНК при низкой температуре.

Тройная роль в экстракции ДНК

1Лизис клеток и удаление белка

Во время стадии клеточного лиза ТЭС ингибирует активность ферментов ДНК и защищает геномную ДНК от деградации путем хелатирования дивалентных ионов металлов (таких как Mg 2 +, Ca 2 +) в растворе.Его буферная система одновременно поддерживает оптимальное pH для протеаз, таких как протеаза К (обычно pH 7.5-8.0), ускоряющие распад клеточных мембран и разложение белков.Эксперименты показали, что эффективность удаления белка в системе лиза с использованием буфера TES улучшается примерно на 25% по сравнению с традиционными методами, создавая хорошую основу для последующих этапов очистки.

2Селективная регуляция осаждения ДНК

TES представляет собой композитный буферный раствор, состоящий из Tris соляной кислоты, EDTA и SDS (TES-EDTA-SDS), который достигает селективного осаждения ДНК путем корректировки ионной прочности раствора.При высоких концентрациях соли (например, 2.5M NaCl), группы сульфоновой кислоты ТЭС действуют через электростатическую экранизацию, способствуя отталкиванию фосфатных групп между молекулами ДНК и формированию растворимого состояния;Когда концентрация соли падает ниже 0.5M, ДНК агрегаты и осаждения из-за воздействия фосфатной основы. Этот процесс оказывает отталкивающее действие на РНК и другие примеси, в результате чего чистота восстановления ДНК более 95%.

3. Защита ферментальной активности

Защитное действие буфера ТЭС на активность ферментов особенно заметно при ограничении реакций ферментального расщепления.Исследования показали, что эффективность резки рестрикционных ферментов (таких как EcoRI) с использованием реакционной системы TES на 18% -22% выше, чем у буфера HEPESЕго устойчивая среда рН уменьшает изменения конформации ферментов, продлевает линейный период реакций разделения ферментов и обеспечивает точность экспериментов по редактированию генов.

Заключение

Буфер TES обладает незаменимыми преимуществами в осаждении и экстракции ДНК благодаря его отличной стабильности pH, свойствам хелации ионов металлов и защитному эффекту ферментов.Оптимизируя экспериментальные условия и изучая новые сценарии применения, TES продолжит направлять исследования молекулярной биологии в более эффективном и точном направлении.Освоение механизма буферизации и методов применения ТЭС, несомненно, является ключом к повышению успешности экспериментов..

ТЭС-буфер используется не только в косметике, его буферизирующие свойства делают его важным в анализе белка, определении активности ферментов и клеточной культуре.Буфер TES, Desheng может обеспечить высокую чистоту и разнообразные виды буферного сырья. Клиенты могут завершить закупки в одноразовом режиме, сэкономив время и расходы. Если у вас есть какие-либо соответствующие намерения,Пожалуйста, свяжитесь с нами для покупки в любое время!