Субстрат хромогена ПОКРЫВАЕТ определение свободных шагов жирной кислоты

Определение свободной жирной кислоты (FFA) в сыворотке важный биохимический индекс теста, и FFA близко связано со здоровьями человека. Потому что компоненты сыворотки сложны и много типов FFA, обнаружение повлияно на много факторов, поэтому ВЕРХНИЕ ЧАСТИ субстрата хромогена обычно использованы для того чтобы определить FFA.

Субстрат хромогена ПОКРЫВАЕТ реагент

Хромоген ПОКРЫВАЕТ шаги определения FFA:

1. В контейнере, сперва добавьте буфферное разрешение проблемы весил согласно коэффициенту формулы, и после этого добавьте ATP, кофермент a, 4 aminoantipyrine, активатор иона (хлорид магния), стабилизатор (BSA), и предохранитель в последовательности. После добавления свойственного количества воды, добавьте сурфактант, отрегулируйте пэ-аш к пэ-аш 6-9 со сконцентрированной хлористо-водородной кислотой, добавьте synthase ацил-CoA наконец, тогда пошевелите и фильтруйте, и добавьте дистиллированную воду к фильтрату для того чтобы получить реагент a количественно.

2. Добавьте буфер к контейнеру, после этого добавьте ВЕРХНИЕ ЧАСТИ хромогена, воду, сурфактант в свою очередь, отрегулируйте пэ-аш к пэ-аш 6-9, в конце концов добавьте HRP и оксидазу CoA ацетила, после этого пошевелите и фильтруйте, и после этого добавьте дистиллированную воду к приводя фильтрату к количественному реагенту b количества получает.

3. Заполните вышеуказанные реагенты в пробирки и сохраните они на 2-8°C. возьмите реагент a и образец и смешайте их в некотором коэффициенте, инкубируйте в течение некоторого времени, и прочитайте значение A1 absorbance; добавьте реагент b и смешивание равномерно, инкубируйте в течение некоторого времени, и прочитайте значение A2 absorbance. Концентрация FFA в концентрации Χ решения sample=standard (ΛΑ_/ΛΑ_#), ΛΑ_=Α2-A1.

Подготовьте буфер:

В чистой стеклянной таре, сперва добавьте буфер HEPES (хороший буфер s, zwitterionic буфер, включая HEPES, Tris, MES, MOPS, etc.) который весилось согласно коэффициенту формулы, добавьте соотвествующее количество воды, и после этого добавьте сурфактант 5ml/l TritonX-100, используйте сконцентрированную хлористо-водородную кислоту для того чтобы отрегулировать пэ-аш к пэ-аш 6-9, количество о 5ml/L, после этого шевелит и фильтрует, и после этого добавляет дистиллированную воду к полученному фильтрату к количественному количеству.

Метод использования ВЕРХНИХ ЧАСТЕЙ как субстрат хромогена для того чтобы обнаружить сыворотку или плазму FFA имеет высокую точность и небольшую ошибку измерения, и самый соответствующий цвет среди хромогенов много Trinder, который низок в CoA ацетила, максимуме в стабильности, и большой в молярном показателе поглощения. первоначальный. В дополнение к ВЕРХНИМ ЧАСТЯМ, субстраты хромогена произведенные Desheng включают TOOS, MAOS, ADPS, etc., которые соответствующие для обнаружения уровня сахара в крови и других биохимических индикаторов.