Сравнение биологических буферов TAE и TBE

Мы всегда добавляем буферные растворы при проведении электрофореза ДНК.

Одна из функций буфера - поддерживать стабильный рН раствора.происходит окислительная реакция на аноде для получения ионов кислорода и водородаДолгосрочный электрофорез сделает анодную кислоту и катод щелочными.Хорошая буферная система должна иметь сильную буферную способность для поддержания pH раствора на обоих полюсах в основном стабильнымЕще одна функция буфера электрофореза заключается в том, чтобы раствор имел определенную проводимость для облегчения миграции молекул ДНК.ДНК - это щелочное вещество, которое получает отрицательный заряд во время электрофореза (буферный pH=8) и мигрирует с отрицательного электрода на положительный электрод.

Еще одним компонентом буфера электрофореза является EDTA, целью которого является хелатирование плазмы Mg2+ и предотвращение активации DNase во время электрофореза.ЭДТА может удерживать эти ионы крепко, чтобы избежать разложения нуклеиновой кислотыНо следует отметить, что ионы магния также являются кофакторами многих ферментов, таких как рестрикционные ферменты, ДНК-полимеразы и т. д.поэтому концентрация ЭДТА обычно не слишком высока (обычно около 1мМ).

ДешенгБуфер TRISупаковка

Итак, какой из них лучше, TAE или TBE? На самом деле, какой из них мне использовать для электрофореза ДНК? Это действительно зависит от цели вашего эксперимента. Давайте посмотрим на разницу между ними.

1Проводимость TBE больше, чем у TAE. Поэтому, по сравнению с TAE, TBE менее вероятно вызывает перегрев в баке электрофореза.TBE рекомендуется для длительного электрофореза.

2. Боровая кислота является ингибитором фермента, поэтому если вам нужно отделить ДНК электрофореза для реакции пищеварения, рекомендуется использовать ТАЭ в качестве буферного раствора электрофореза

3Для фрагментов меньше 300 bp скорость миграции в TBE быстрее на 2% геле агарозы.

4Фрагменты размером более 2 кБ мигрируют быстрее в TAE (в 0,8% геле агарозы), а скорость примерно на 10% быстрее, чем в TBE.TAE более подходит для восстановления фрагмента ДНКПо сравнению с TBE, TAE имеет более высокое разрешение для сверхкольцованной ДНК.

Таким образом, вопрос о том, лучше ли TBE или TAE, не может быть обобщен.Биологический буфер, разработанный Дешенгом, имеет широкий диапазон буферов.Система может готовить буферы с широким диапазоном значений рН и может предоставить различные спецификации упаковки.Добро пожаловать для консультации и покупки.