Company News About Лизис буфферКАС7365-45-9 ХЭПЭС использован для извлечения нуклеопласмик протеина
ХЭПЭС хйдроксетхылпиперазине-етанесульфоник кислота 4 (кислота), белый кристаллический порошок Н'-а-хйдроксытхылпиперазине-Н'-етанесульфаник, буфер иона водопода, который может контролировать постоянн ряд пэ-аш в течение длительного времени. Эффективный ряд буфера пХ6.8-8.2. Обыкновенно использованный для подготовки буфера лизиса извлечения протеина, буфера культуры клетки, етк.
Постоянная диссоциации ХЭПЭС 7,5. Когда равномольный смешивать ХЭПЭС и своего на-ХЭПЭС, пэ-аш решения 7,5. Вообще, фиксированная молярная концентрация ХЭПЭС подготовлена во-первых, и после этого пэ-аш отрегулирован к определенному значению с сильным основанием (вообще обыкновенно используемым НаОХ). Здесь, НаОХ только служит обеспечить ОХ. Также возможно использовать другие сильные основания как КОХ. Когда разница в пэ-аш большая, используйте сконцентрированный НаОХ. Для настраивать, используйте разбавленный НаОХ. Если твердое тело НаОХ добавлено сразу, то ошибка слишком большая, и когда НаОХ растворенные экзотермичные и изменение температуры может повлиять на точность электрода пэ-аш.
Подготовка буфера лизиса ХЭПЭС:
| Решение а лизиса: | Решение б лизиса: | ||
| ХЭПЭС | 10ммол/Л, пХ7.9 | ХЭПЭС | 20ммол/Л, пХ7.9 |
| ККл | 10ммол/Л | НаКл | 420ммол/Л |
| МгКл2 | 1.5ммол/Л | МгКл2 | 1.5ммол/Л |
| ДТТ | 1ммол/Л | ДТТ | 0.5ммол/Л |
| 甘油 | 5% | глицерин | 25% |
| ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ | 0.2ммол/Л | ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ | 0.2ммол/Л |
| НП-40 | 1% | ||
| ПМСФ (добавьте перед использованием) | 1ммол/Л | ПМСФ (добавьте после пользы) | 0.5ммол/Л |
| апротинин | 3мг/Л | апротинин | 5мг/Л |
| леупептин | 3мг/Л | леупептин | 5мг/Л |
| пепстайнА | 2мг/Л | пепстайнА | 3мг/Л |
Шаги:
1. Соберите клетки в трубку ЭП и центрифугу (4000р/мин, 5мин, 4 градуса).
2. Помойте три раза с ПБС, центрифугуйте как выше, сбросьте супернатант.
3. Добавьте μл 100 буфера а, инкубируйте на льде для 10 минута, центрифугуйте (14000 р/мин, 1 минута), и сбросьте супернатант.
4. Ресуспензируйте лепешку в 60 микролитрах буфера б, смешайте хорошо, центрифуга на льде для 30мин, центрифуга (14000р/мин, 15мин, 0 градусов), соберите супернатант и сбросьте лепешку.
Среди их, роль лысате а главным образом использована для того чтобы выпустить цитоплазменные протеины и протеины мембраны, лысате б использовано для того чтобы выпустить ядерные протеины, НП-40 и сурфактант и тензид, своя роль оба она разрушает клеточную мембрану (слабую), и может совместить с выпущенным протеином для предотвращения высыпания, так больше всего цитоплазменного протеина и протеин мембраны можно извлечь после того как супернатант извлекается центрифугированием в первом шаге. После того как ядерный протеин извлечен, его можно сделать диализ с лысате а для 2х и совместить для ИП; или разбавленный с другими решениями и замененный на сконцентрированные трубки центрифуги для ИП или других экспериментов.
Главное сырье реагентов Дешенг ин витро диагностических являются следующими: 1. буфер Трис Бис, БИКИНЭ, ХЭПЭС, КРЫШКИ, МОПС, КРАНЫ, ЭППС, МОПСО, ТРУБЫ, ПОДБАДРИВАЮЩИЙ; 2. хемилюминесцентное луминол реагентов, исолуминол, эстер ДМАЭ-НХС акридина, эстер НСП-ДМАЭ-НХС акридина, соль НСП-СА акридина, соль НСП-СА-НХС акридина, гидразид НСП-СА-АДХ акридина, эстер МЭ-ДМАЭ-НХС акридина; 3. Реагенты ТООС нового Триндер, ВЕРХНИЕ ЧАСТИ, СУЕТЫ, АДПС, АЛЬПЫ, ДАОС, ХДАОС, МАДБ, МАОС; 4. гель для добавок трубки собрания крови, гепарин разъединения Анти--облучением натрия, гепарин лития, ЭДТА-2К3К, ЭДТА-2НА, повышает коагулянт, порошок свертывания, етк. к тому же, он также производит средства массовой информации перехода вируса и карбомер 940/980. Добро пожаловать друзья, который нужно прийти купить.
