В родственном биохимическом испытании подготовок энзима, в дополнение к измерять содержание, концентрацию, и стабильность различных индикаторов, который нужно испытать, также индикаторы для обнаруживать протеиновую активность, как уровень сахара в крови, липиды крови, и креатинин. Для индикаторов как оксидаза аминоферазы и саркозина, протеиновой активности нужно быть измеренным.
Вообще говоря, протеиновая активность работа катализирования энзима, которое включает кинетический параметр энзима- Michaelis постоянн Km, который значит концентрацию субстрата (s) когда ферментационная реакция достигнет половину максимальной скорости (Vm). Скорость реакции энзима равномерна, не линейна как концентрация, но число метров в Changshu постоянн, который характерное физическое количество энзима. Константа Michaelis изменений энзима с измеренным типом субстрата, температурой реакции, пэ-аш и ионной прочностью. В тех же условиях, независимо от того, какой концентрация энзима, концентрация необходимого субстрата это же когда максимальный тариф реакции достигается.
Метод измерения константы Michaelis оксидазы саркозина:
Подготовьте решение саркозина с концентрацией 1,0, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0, 10.0mmo1/L с буфером Tris-HC1 пэ-аш 8,0, и прореагируйте на 37°C на 5 минут определите начальную деятельность при оксидации SOX на различной концентрации саркозина. Тариф реакции v и 1/V получен. Согласно методу двойника Lineweaver-Burk взаимному составляя карту, с 1 [s] как абсцисса и 1/V как ордината, были высчитаны Km и Vmax SOX к саркозину.
Заключение константы Michaelis оксидазы саркозина:
Константу Michaelis можно использовать для того чтобы судить характерность энзима. Небольшой значение Km, большой сродство между энзимом и субстратом, и более соответствующий субстрат как естественный субстрат энзима. Согласно тесту и вычислению оксидазы саркозина выше, уравнение Michaelis y=1232.5X+8.7012 и коэффициент соотношения 0,9947: высчитанные значения Km и Vmax SOX к саркозину 141.6mmol/L и 0.115mmol, соответственно/(L.min).
Оно должно быть замечено что SOX оксидазы саркозина от различных источников имеет некоторую разницу в константе Michaelis саркозина. Например, значение Km SOX от Corynebaclerium к саркозину 21mmol/L. В виду того что константа Michaelis не имеет ничего сделать с концентрацией энзима и типом энзима, этот пункт можно также использовать для идентификации или определения энзима. Desheng биохимическое фокусирует на поле биохимического обнаружения, и предусматривает разнообразие подготовки энзима включая SOX, эстеразу холестерола, оксидазу глюкозы, etc.
