Защитное влияние aminomethane tris (оксиметильного) на перерывах стренги ДНК

Повреждение ДНК обычно происходит двумя способами: прямым и косвенным.Косвенный эффект включает радиолиз раствора вокруг ДНК и последующее взаимодействие между ДНК и продуктами радиолиза..

По оценкам, 80% смертельных последствий высокого уровня ЛЭТ возникают в результате прямых воздействий.что также помогает прояснить молекулярный механизм высокого относительного биологического эффекта высокого излучения LET.

ТРИС основной порошок

При исследовании повреждения ДНК, вызванного ионизирующим излучением, очевидно, полезно получить более точные и надежные экспериментальные результаты для выбора подходящей системы растворения ДНК.Наиболее распространенной системой растворения ДНК является буфер, а его основными компонентами являются 10 ммоль/ л трис (триметил аминометан) и 1 ммоль/ л ЭДТА (этилендиамин тетраоситная кислота) при pH 8.0Давайте посмотрим на основные принципы исследования.

Плюсмидная ДНК PUC19, растворенная в чистой воде, 10 ммоль/лТрис-база, 1 ммоль / л ведущей РА и те буфер был облучен излучением углеродных ионов 100 кВ / ч.м. (начальная энергия 290 МеВ / U).Пропорции различных молекул ДНК в различных растворах анализировались путем электрофореза гелем агарозы, и среднее количество разрывов одноцепочки (SSB) и двойных цепочек (DSB) в каждом плазмиде было рассчитано при различных дозах.

Было обнаружено, что Трис может значительно защитить ДНК плазмиды от облучения тяжелыми ионами углерода, ингибируя производство SSB и DSB,В то время как EDTA может усиливать производство SSB и ингибировать образование DSB,.

Электрофоретограмма молекулы ДНК pUC19 в различном растворе и дозе облучения

На приведенном выше рисунке видно, что с увеличением дозы облучения процент свертываемой ДНК в общей ДНК уменьшается.Содержание сверхкатушки ДНК в Трис и те буфер медленно снижаетсяКогда доза увеличивалась до 150Gy, содержание сверхсвернутой ДНК в Tris и буфере все еще составляло более 80%, но содержание сверхсвернутой ДНК в EDTA и воде составляло менее 60%.Результаты показали, что ДНК в три производит меньше разрывов нити, чем в воде и EDTA.

Серия результатов показывает, что ТРИС оказывает явный защитный эффект на повреждение ДНК, вызванное облучением углеродными ионами на 100 кВ/л ~ м.Сверхкатушка ДНК существовала все время и показала очевидную защиту по сравнению с чистой водой и раствором EDTA.