Причины высокого фона нового реагента Триндера TODB

При использованииновый реагент Триндера TODB, высокий фон является распространенной проблемой, которая влияет на результаты обнаружения, в то время как недостаточное уплотнение и неполная промывка тарелок являются ключевыми факторами, которые легко упускаются из виду во время работы.Эти два вопроса могут вызвать аномальное увеличение цвета фона из-за неспецифического связывания и помех от остаточных веществ.Ниже приведены подробный анализ и решение.

Недостаточное закрытие: движущая сила "за кулисами" неспецифических комбинаций

Функция этапа блокировки заключается в блокировке несвязывающихся участков на поверхности реакционного носителя (например, ферментально-связанной иммуносорбентной тестовой пластины).субстраты, конъюгаты ферментов и другие компоненты в реагенте TODB будут случайным образом адсорбироваться на поверхность носителя, образуя цветовой сигнал без участия целевого вещества,непосредственное увеличение значения фона.

конкретная причина

1Недостаточное время уплотнения: в целом, для уплотнения необходимо помещать его при 37 °C в течение 60 минут или при комнатной температуре в течение 120 минут.активные участки на поверхности носителя не могут быть полностью покрыты блокирующим раствором (например, BSA)., обезжиренное молоко в порошке), а те гидрофобные области, которые не блокируются, активно адсорбируют белковые компоненты в реакционной системе TODB, что приводит к окрашению фона.

2Слишком низкая концентрация блокирующего раствора: когда эффективных ингредиентов в блокирующем растворе недостаточно, например, когда исходная 5% BSA падает до 1%,между молекулами не может образовываться плотная защитная пленкаКомпоненты, такие как пероксидаза хрена в реагенте TODB, будут прилипать к внутренней стенке пор пластинки посредством гидрофобных взаимодействий.и неспецифические реакции произойдут с субстратом во время реакции..

3Неисправность уплотнительного раствора: если уплотнительный раствор неоднократно замораживается и расплавляется или хранится дольше срока годности,белковые компоненты внутри будут разрушаться и терять свою герметичность, в результате чего на поверхности носителя возникает множество "открытых" участков, которые становятся источником фоновых сигналов.

Неполная промывка доски: "эффект накладывания" остаточных веществ

Основная функция мытья тарелок заключается в удалении свободных реагентов (таких как свободные антитела, прекурсоры TODB).остаточные вещества будут продолжать участвовать в развитии цвета в последующих реакциях, что позволяет накапливать помехи фона.

Конкретная причина

1. Слишком мало промывок тарелок: обычное тестирование требует промывания тарелок 3-5 раз. Если это сокращается до менее 2 раз, остаточные свободные ферментные комплексы в колодце не могут быть полностью удалены,и реакция будет реагировать с субстратом TODB, что приводит к дополнительному развитию цвета.

2. Слишком много остатков моющего средства: после мытья доски, если отверстия на абсорбирующей бумаге не перевернуты и не высушены, в каждом отверстии будет больше остатков моющего средства,и некоторые компоненты внутри нарушат баланс реакционной системы TODBВ то же время, остаточные конъюгаты ферментов будут диффузировать в соседних отверстиях с жидкостью, вызывая перекрестное загрязнение и поднимая фон.

3. есть проблема с стиральной машиной: когда игла стиральной машины заблокирована или давление недостаточноуголки отверстий на пластине станут зонами, которые не могут быть промытыОставшийся реагент TODB будет кристаллизоваться после сушки и участвовать в реакции, когда снова растворится, в результате чего цвет местного фона потемнеет.

Резюме: Операционные детали определяют эффективность фонового контроля

Несмотря на то, что запечатка и промывка пластин являются обычными шагами, их качество напрямую влияет на уровень фонового содержания реагентов TODB.Рекомендуется использовать метод "продление времени уплотнения + увеличение количества промывок тарелок", в сочетании с такими мерами, как проверка концентрации уплотнительного раствора и регулярная калибровка стиральной машины,которые могут значительно уменьшить значение фонового излучения и обеспечить точность результатов обнаружения.

Desheng специализируется на производстве более 10 новых реагентов Trinder, включая TODB.он может гарантировать, что TODB появляется в виде порошка с чистотой до 990,5%, высокая растворимость в воде и стабильная производительность для обеспечения точности экспериментальных результатов.Desheng имеет место на рынке сырьевых материалов для диагностических наборов in vitro с высококачественными продуктамиЕсли у вас есть какие-либо соответствующие намерения, пожалуйста, нажмите на официальный сайт для консультации!