Сходства и разницы между Трис и Трис-ХКл и Трис-ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТОМ

Трис: аминометане триметхылол

Трисметхыламинометане (Tris) органическое соединение с формулой (ХОКХ 2) 3КНХ 2. Трис использовано для подготовки буферов в экспериментах по биохимии и молекулярной биологии. И буфера ТАЭ и ТБЭ (используемые для того чтобы растворить нуклеиновые кислоты) используемые в биохимических экспериментах требуют Трис, которое может сконденсировать с альдегидами когда оно содержит аминовые группы. Амортизировать характеристики Трис слабое основание. На комнатной температуре (25°К), свое пКа 8,1. Согласно теории буферизации, эффективный ряд буферизации буфера Трис между пэ-аш 7,0 и 9,2.

Пэ-аш водного раствора основания Трис около 1 0,5. Вообще, добавлены, что регулирует хлористо-водородная кислота значение пэ-аш к требуемому значению, и после этого буфферное разрешение проблемы с этим значением пэ-аш можно получить. Но в то же время, влияние температуры на пКа Трис должно быть проконтролировано.

В виду того что буфер Трис слабый щелочной раствор, ДНК будет депротонатед в таком решении, таким образом улучшая свою растворимость. Люди часто добавляют ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ к буферу хлористо-водородной кислоты Трис для того чтобы сделать «буфер ТЭ». Буфер ТЭ использован для стабилизации и хранения ДНК. Если пэ-аш-отрегулированный кислый раствор заменен на укусную кислоту, то «получен получен буфер ТАЭ» (Трис/Асетате/ЭДТА), и если он заменен на борную кислоту, то, тогда «буфер ТБЭ» (Трис/Борате/ЭДТА). Эти 2 буфера использованы в экспериментах по электрофореза нуклеиновой кислоты.

Трис-ХКл 1 м (пХ7.4, 7,6, 8,0)

Компонентный Трис-ХКл концентрации 1М

Том 1Л подготовки

Метод подготовки:

1. Весьте 121.1г Трис в беакер 1Л.

2. Добавьте о 800мл деионизированной воды и пошевелите для того чтобы растворить.

3. Добавьте количество сконцентрированного ХКл как показано в таблице ниже для того чтобы отрегулировать необходимое значение пэ-аш.

ХКл сконцентрированный пэ-аш

7,4 о 70мл

7,6 о 60мл

8,0 о 42мл

4. Принесите решение до 1 Л.

5. После высокотемпературной и высокой стерилизации давления, храните на комнатной температуре.

Примечание: Позвольте решению охладить к комнатной температуре перед регулировать значение пэ-аш, потому что значение пэ-аш решения Трис меняет значительно с температурой. Когда температура увеличивает 1°К, значение пэ-аш решения уменьшает около 0,03 блоками.

Трис-ХКл 1,5 м (пХ8.8)

Компонентный Трис-ХКл концентрации 1.5М

Том 1Л подготовки

Метод подготовки

1. Весьте 181.7г Трис в беакер 1Л.

2. Добавьте о 800мл деионизированной воды и пошевелите для того чтобы растворить.

3. Отрегулируйте пэ-аш до 8,8 с сконцентрированным ХКл.

4. Принесите решение до 1 Л.

5. После высокотемпературной и высокой стерилизации давления, храните на комнатной температуре.

Примечание: Решение должно быть охлажено к комнатной температуре перед регулировать значение пэ-аш, потому что значение пэ-аш решения Трис меняет значительно с температурой,

Для каждого роста 1°К температуры, пэ-аш решения уменьшает приблизительно на 0,03 блока.

Преимущества буфера Трис-ХКл являются следующими:

① потому что основание Трис более алкалическо, вы можете использовать эту систему буфера для подготовки буфферного разрешения проблемы с широким диапазоном значений пэ-аш от кислотного к алкалическому;

② меньшее взаимодействие к биохимическому процессу, отсутствие высыпание с кальцием, ионы магния и ионы тяжелого метала.

Недостатки являются следующими:

① значение пэ-аш буфферного разрешения проблемы значительно повлияно на концентрацией решения, буфферное разрешение проблемы разбавлено 10 времен, и изменение в значении пэ-аш больше чем 0,1;

② влияние температуры большое, и изменение температуры имеет большее влияние на значении пэ-аш буфферного разрешения проблемы, намелы: △пКа/℃=-0.031, например: пэ-аш буфферного разрешения проблемы на 4℃=8.4, после этого значения пэ-аш на 37℃= 7,4, поэтому его необходимо подготовить на температуре пользы, буфер Трис-ХКл подготовленный на комнатной температуре нельзя использовать на 0 ℃ | ℃ 4.

③ легко поглотить СО2 в воздухе, поэтому подготовленный буфер должен плотно быть загерметизирован.

④ это буфферное разрешение проблемы помешает с некоторыми электродами пэ-аш, поэтому используйте электрод совместимый с решением Трис.

Решение Трис может поглотить углекислый газ от воздуха, внимание оплаты к герметизировать во время хранения, если вы требуете стерильности, то вы может добавить азоид натрия.

ТЭ буфер Трис-ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТА (10мМ Трис, ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ 1мМ, пХ7.4 пХ7.6 пХ8.0).

Обыкновенно используемые реагенты молекулярной биологии для растворения ДНК.

Подготовьте буфер 10×ТЭ (пХ7.4, 7,6, 8,0)

Компонентная концентрация: Трис-ХКл 100мМ, ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ 10мМ

Том подготовки: 1Л

Метод подготовки:

1. Измерьте следующее решение и установите в беакер 1Л.

буфер Трис-ХКл 1М (пХ7.4, 7,6, 8,0) 100 мл

ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ 500 мМ (пХ8.0) 20мл

2. Добавьте о 800мл деионизированной воды к беакер и смешайте равномерно.

3. После регулировать том к 1Л, простерилизуйте на высокотемпературном и высоком давлении.

4. Храните на комнатной температуре.