Сходства и разницы между Трис и Трис-ХКл и Трис-ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТОМ

Tris: триметилол аминометан

Трисметиламинометан (Tris) - органическое соединение с формулой (HOCH 2) 3CNH 2.Трис-базаиспользуется для приготовления буферов в биохимических и молекулярных биологических экспериментах.который может конденсироваться с альдегидами, когда содержит аминогруппыПри комнатной температуре (25°C) его pKa составляет 8.1Согласно теории буферизации, эффективный диапазон буферизации буфера Триса находится между pH 7,0 и 9.2.

pH водного раствора основы Триса составляет около 10.5Обычно добавляется соляная кислота, чтобы регулировать значение pH к желаемому значению, и затем буферный раствор с этим значением pH может быть получен.должно контролироваться влияние температуры на pKa Tris.

Поскольку буфер Tris является слабым щелочным раствором, ДНК будет депротонирована в таком растворе, тем самым улучшая его растворимость.Люди часто добавляют EDTA в буфер Трис соляной кислоты, чтобы сделать "TE буфер". ТЭ-буфер используется для стабилизации и хранения ДНК. Если кислотный раствор, регулируемый pH, заменить уксусной кислотой, то получится "TAE-буфер" (Tris/Acetate/EDTA),и если он заменен борной кислотойЭти два буфера используются в экспериментах по электрофорезу нуклеиновых кислот.

1 M Tris-HCl (pH7).4, 7.6, 8.0)

Концентрация компонента 1M Tris-HCl

Объем препарата 1 л

Способ приготовления:

1Весьте 121,1 грамма Триса в литровый стаканчик.

2Добавьте около 800 мл деионизированной воды и перемешайте, чтобы раствориться.

3Добавьте количество концентрированного HCl, как показано в таблице ниже, чтобы скорректировать требуемое значение pH.

pH Концентрированный HCl

7.4 около 70 мл

7.6 около 60 мл

8.0 около 42 мл

4Добавьте раствор до 1 л.

5После стерилизации при высокой температуре и давлении хранить при комнатной температуре.

Примечание: Доставьте раствор остыть до комнатной температуры, прежде чем регулировать значение pH, потому что значение pH раствора Tris сильно варьируется в зависимости от температуры.Когда температура повышается на 1°C, значение pH раствора снижается примерно на 0,03 единицы.

1.5 M Tris-HCl (pH8.8)

Концентрация компонента 1,5M Tris-HCl

Объем препарата 1 л

Способ приготовления

1Весит 181,7 грамма Триса в литровом стакане.

2Добавьте около 800 мл деионизированной воды и перемешайте, чтобы раствориться.

3Настроить рН на 8,8 с концентрированным HCl.

4Добавьте раствор до 1 л.

5После стерилизации при высокой температуре и давлении хранить при комнатной температуре.

Примечание: раствор следует охладить до комнатной температуры перед корректировкой значения pH, так как значение pH раствора Tris сильно варьируется в зависимости от температуры,

На каждое повышение температуры на 1°C pH раствора уменьшается примерно на 0,03 единицы.

Преимущества буфера Tris-HCl:

1Поскольку основание Tris более щелочное, вы можете использовать эту буферную систему для приготовления буферного раствора с широким диапазоном значений pH от кислотного до щелочного;

2 Мало вмешательства в биохимические процессы, отсутствие осаждения ионами кальция, магния и ионами тяжелых металлов.

Недостатки:

1 На значение pH буферного раствора сильно влияет концентрация раствора, буферный раствор разбавляется в десять раз, и изменение значения pH больше 0.1;

2Эффект температуры большой, и изменение температуры оказывает большое влияние на значение pH буферного раствора, а именно:031, например: pH буферного раствора при 4°C=8.4, то значение pH при 37°C= 7.4, поэтому он должен быть подготовлен при температуре использования, буфер Tris-HCl, приготовленный при комнатной температуре, не может использоваться при 0 °C ~ 4 °C.

3 Углекислый газ легко поглощается в воздухе, поэтому подготовленный буфер должен быть плотно запечатан.

Этот буферный раствор будет влиять на определенные электроды pH, поэтому используйте электроды, совместимые с раствором Tris.

Раствор триса может поглощать углекислый газ из воздуха, обратите внимание на герметизацию во время хранения, если вам нужна стерильность, вы можете добавить азид натрия.

TE - буфер Tris-EDTA (10mM Tris, 1mM EDTA, pH7,4 pH7,6 pH8,0).

Обычно используемые молекулярные биологические реагенты для растворения ДНК.

Подготовить буфер 10×TE (pH7).4, 7.6, 8.0)

Концентрация компонента: 100mM Tris-HCl, 10mM EDTA

Объем препарата: 1 л

Способ приготовления:

1Измерить следующий раствор и поместить в стакан 1 л.

1M Трис-ГКЛ-буфер (pH7).4, 7.6, 8.0) 100 мл

500 мМ EDTA (pH8.0) 20 мл

2Добавьте около 800 мл деионизированной воды в стакан и смешайте равномерно.

3После установки объема на 1 л стерилизовать при высокой температуре и высоком давлении.

4Хранить при комнатной температуре.