Настолько много типов биологических буферов, я считаю, что мне не нужно сказать больше, людей знают их понимают ли они или не делают. Поэтому, много неопределенностей в нашем выборе. Я не знаю что вам нужно и что соответствующее. В ответ на эту проблему, Desheng, по мере того как изготовитель биологических буферов, учит вам как выбрать.
1. Ряд буфера
Каждый буфер имеет самую высокую амортизируя емкость в ряде пэ-аш. Эта емкость обычно определена pKa буфера. Вы должны выбрать буфер со значением pKa близко к среднему значению пожеланного ряда (обычно, порекомендованы, что использует буфер со значением pKa по крайней мере внутри один блок пэ-аш значения пэ-аш цели).
2. изменения пэ-аш во время эксперимента
Важно рассматривать может ли пэ-аш увеличить или уменьшить во время эксперимента. Если вы ожидаете пэ-аш для увеличения, то вы должны выбрать буфер с pKa немножко более высоким чем оптимальным значением в начале эксперимента. Противоположность также истинна: если вы надеетесь уменшение в пэ-аш, то выберите буфер с более низким pKa.
3. Концентрация буфера
Концентрацию буфера необходимо отрегулировать для того чтобы иметь достаточную емкость для экспириментально системы. Вкратце, если концентрация буфера слишком низка, то она не будет стабилизировать пэ-аш решения. Наоборот, если концентрация слишком высока, то буфер правоподобен для влияния эксперимента. Вообще, порекомендованы, что использует концентрацию более высоко чем 25 mM.
Для систем которые активно не обменивают протоны водопода, порекомендованная концентрация обычно 25-100 mM. Для систем где обмен протона может произойти, порекомендованы, что использует концентрацию буфера 20 раз более высокую чем молярная концентрация обменянных протонов.
При подготовке буфферного разрешения проблемы, вспомните отрегулировать концентрацию решения к концентрации предполагаемого использования.
4. Изменения температуры
Пэ-аш буфферного разрешения проблемы должен быть установил согласно температуре на которой эксперимент будет выполнен. Температура сразу влияет на pKa буфера, который в свою очередь влияет на значение пэ-аш и емкость буферизации системы. Эта ситуация может быть очень критической в биологических системах. В биологических системах, необходима, что делает точная концентрация иона водопода систему реакции побежать при максимальном эффективность.
PKa некоторых буферов (как ТРУБЫ) более менее чувствительно к изменениям температуры, но другим вариантам (как TRIS, КРАНЫ, TES, или Tricine) больше повлияно на этими изменениями.
