Использование буфера Tris

Трис - это звиттерионный буфер, часто используемый в биологических и научных исследовательских экспериментах, конечно, есть также много непосредственно используемых в медицине и промышленности.Итак, каковы конкретные применения различных буферов триса, как использовать буфер триса, и понять характеристики триса и различных биотехнологий, таких как электрофорез или хроматография.

Основная информацияБаза TRIS:

Номер CAS: 77-86-1

Молекулярная масса: 121,14 г / моль

Формула: C 4 H 11 NO 3

Доступный диапазон рН: 7,2-9.0

pKa (25°C): 8.06

Максимальная длина волны (λmax) λ: 260 нм Amax: 0.10: λ: 280 нм Амакс: 0.08

Для чего рекомендуется TRIS?

lОбычно используется в буфере гелевого электрофореза (TAE или TBE)

Обычно используется для приготовления буфера Laemmli (используется для денатурации и загрузки образцов белка в SDS-PAGE)

Аинообменная хроматография

Используется для оценки бактериального эндотоксина

Для капиллярной электрохроматографии (CEC) из-за его низкой ионной подвижности

Используется для комплексации металлов

Может использоваться для коррекции ацидоза.

Какие вопросы следует рассмотреть перед выбором TRIS для исследования?

Не очень эффективно ниже pH 7.5

У него есть потенциально реактивные первичные амины и обычно может использоваться в качестве ингибитора.

Он имеет тенденцию проникать в мембрану, поэтому он не подходит для большинства клеточных культур.

Утоксичен для многих клеток млекопитающих

uНе подходит для анализа бицинхониновой кислоты (BCA)

Это может повлиять на Брэдфордский метод связывания красителя для определения белка.

Ухелированный кальций и другие незаменимые металлы хорошо известны.

pH раствора, содержащего Трис, сильно зависит от температуры, поэтому очень важно готовить буфер Триса при температуре использования.

uОно может взаимодействовать с буферной системой бикарбонат/CO2

В зависимости от применения в различных отраслях промышленности, соображения различны, и требования к уровню триса также будут отличаться,чистота и некоторые другие показатели также будут относительно разными, и эти факторы часто требуют, чтобы покупатели и производители могли углубить коммуникацию.

Советы по TRIS:

ØВысокая растворимость в органических растворителях

ØРеагирует с различными ферментами и ингибирует несколько ферментов

Ø Может инактивировать популярный ингибитор RNase DEPC