Хорошие буфферные разрешения проблемы могут значительно уменьшить ряд зыбкости пэ-аш при добавлении небольшого количества кислоты или основания и воды, смешанного решения слабой кислоты и своего соли (как HOAc и NaOAc), смешанного решения слабого основания и своего соли (как NH3·H2O и NH4Cl) etc. все буфера. Буфера широко использованы в биохимических экспериментах и играют важную роль в процессе разъединения и очищения протеина.
Разъединение и очищение протеина сложная задача, и процесс очищения каждого протеина не точно такой же. Поэтому, только путем использование соотвествующих методов очищения протеина в извлечении и подготовке протеина процесс можно стабилизированный протеин получить. В течении процесса, стабильность протеина зависит от поликомпонентной системы буфера использовала. Самое лучшее условие растворить протеин пока поддерживающ биологическую деятельность.
С большего части из протеина очищение выполнено in vitro, системы буфера соответствие к рекомбинатным протеинам на рынке могут передразнить условия естественных протеинов в - vivo для того чтобы достигнуть цели стабилизированных хранения и транспорта протеина.
Основная функция буфера обеспечить самую соответствующую окружающую среду для протеина цели. В процессе выбирать и подготовки буфера, следующие факторы необходимо рассматривать:
1. Состав буфера:
Компонент сам буфера буфера не должен взаимодействовать с протеином. Например, некоторые энзимы заблокированы группой в составе фосфата буфер фосфата, которая может привести к потере функции протеина. Она также показывает что соответствующий буфер для каждого протеина не точно такой же, поэтому потребители должны попробовать выбрать буфер порекомендованный в руководстве растворяя протеин для обеспечения стабильности протеина и соответствуя работы. Типичные ряды концентрации буфера от 20 до 100 mM, и могут быть необходимо для добавления других компонентов к ионным прочност-чувствительным протеинам или ионам металла как магний (солянное раствор 150 mM), который необходим для некоторых энзимов для того чтобы быть активен.
2. пэ-аш:
Пэ-аш зависит от фактического применения протеина. Если протеин использован для некоторых, то типы биологических assays, как assays энзима, пэ-аш на которых энзим показывает самую лучшую работу должны быть выбраны. При подготовке протеинов для методов очищения (ионной реакции, фильтрации геля, etc.), пэ-аш должен быть выбран согласно экспириментально условиям для того чтобы получить максимальную эффективность очищения. Когда специфический пэ-аш необходим, пэ-аш на котором протеин показывает самая лучшая стабильность самое лучшее. Это особенно истинно для хранения протеина.
Desheng специализирует в научных исследованиях и разработки, продукции и продажах добавок трубки собрания крови, in vitro диагностические реагенты, биологические буфера, и люминисцентные субстраты. Разнообразие материалы буфера (TRIS, HEPES, MOPS, etc.) можно обеспечить, и буфера различной концентрации можно установить согласно потребностям клиента.
