Буфер HEPES представляет собой 2 - (4 - (2-гидроксиэтил) пиперазин) этаносульфоническую кислоту, CAS 7365-45-9. Этот буфер обычно используется в биохимических экспериментах для регулирования значения pH реакционной системы,например, раствор для сохранения вируса или раствор для сохранения клеток..
Существует два типаБуфер HEPESКонцентрация раствора HEPES составляет 10- 50 ммоль/ л, а буферная емкость может быть достигнута, когда культура содержит 20 ммоль/ л HEPES.Более того,, этот тип буфера имеет много преимуществ по сравнению с фосфатным буфером. Он нетоксичен для клеток и может контролировать постоянный диапазон pH в течение длительного времени. Это хороший буфер для ионов водорода.
порошок гепса
Константа диссоциации буфера HEPES составляет 7,65 (при 20 °C), а диапазон pH буфера - 6,6-8.6, который обычно подходит для реакционной системы с рН 6,8-8.2Он может использоваться непосредственно с гидроксидом натрия или смешиваться с солью и регулировать pH с гидроксидом натрия.
1、 500 мл 1 моль/ л HEPES, pH 7.0, исходный раствор: взвесить 0,5 моль (119,15 г) гидроксиэтилопиперазинэтаносульфонической кислоты, затем настроить на требуемое значение pH с 0,5 м ~ 1 М гидроксида натрия,Наконец, зафиксировать объем с дистиллированной водой., и запечатать при 4 °C.
2、 HEPES буфер 500 мл с небольшим количеством соли: HEPES > 6,5 g, NaCl > 8, 0 g, na2hpo4, 7 h2o > 0, 198 g, регулировать значение pH с 0,5 m NaOH > водный раствор, наконец, фиксировать объем и хранить при низкой температуре.
3、 Приготовление 2 × HEPES буферного раствора соли: 1,6 g NaCl, 0,074 g KCl, 0,027 g na2hpo4,2 h2o, 0,2 g глюкана или декстрана и 1 g HEPES были растворены в 90 ml дистиллированной воды,настраивается на требуемое значение pH с 0.5m NaOH, а затем разбавляется до 100 мл с дистиллированной водой.
Хотя буферная система HEPES не так обширна, как у PBS, она имеет больше преимуществ: ионная прочность PBS выше, чем у HEPES,и ионная прочность будет влиять на растворимость других растворимых в смешанном раствореВ общем случае, когда можно использовать ПБС, можно использовать HEPES, но когда используется HEPES, PBS не может быть заменен.
Буфер HEPES похож на трубу, но водорастворимость трубы слаба, поэтому его можно превратить в натриевую соль трубы.которые также могут быть приготовлены в готовые к использованию буферные растворы с конкретными концентрациями при необходимости.