Когда вы использовали бы буфер Hepes?

Полное имяБуфер HEPESявляется 4-гидроксиэтилпиперазиновая этаносульфоновая кислота, CAS 7365-45-9, HEPES часто используется в биологических буферах, диапазон буфера pH: 6,8-8.2, основным компонентом буфера гепса является гидроксиэтилпиперазин этиловая серная кислота, HEPES является амфотерическим буфером, который растворим в воде и не образует стабильных комплексов с ионами металлов.Он обладает хорошей буферной способностью в диапазоне pH 7.2-7.4Он в основном используется в биохимических диагностических комплектах, комплектах экстракции ДНК/РНК и диагностических комплектах ПЦР.

Используется в различных биохимических реакциях:

1. HEPESбуферчасто используется в качестве буферного реагента в клеточной культуре различных типов организмов, клеточной адгезии, краткосрочной клеточной агрегации и культуре, а также в качестве буфера для очистки тканей и клеток;

2В исследованиях белка PIPES часто используется в качестве компонента и элюента буфера связывания в катионно-обменной хроматографии;

3В исследованиях ДНК PIPES используется в качестве буфера для фосфата кальция и системы образования осадков ДНК, а также в качестве буфера для экспериментов AFM и электропорации.

4Кроме того, HEPES оказывает некоторое влияние на реакцию между ДНК и рестрикционными ферментами, и метод Лоури не подходит для определения содержания белка.

5. Буфер HEPES часто используется в исследованиях органелл и высоко изменчивых, чувствительных к pH белков и ферментов, а также биохимических диагностических наборов,Набор экстракции ДНК/РНК и комплект диагностики ПЦР.

6Реакционный буфер, буфер предварительного гибридизации и буфер гибридизации для отделения и анализа ядерных компонентов РНК; используется для РНК и Т4РНК.Молекулярный биологический класс используется для маркировки 3'-конца РНК с лигазой РНК T4, отделять и анализировать компоненты реакционного буфера, буфера предгибридизации и буфера гибридизации ядерной РНК.

Порошок HEPES

Вопросы, связанные с HEPES

1pH требуется для большинства клеток 7.2-7.4Фибробласты предпочитают более высокий pH (7,4-7,7), в то время как прохождение трансформированных клеточных линий требует кислотности.0-7.4) Поскольку большинство культурных жидкостей буферизируются системой бикарбоната натрия (NaHCO3) и CO2,концентрация CO2 в газовой фазе должна находиться в равновесии с концентрацией бикарбоната натрия в жидкости культурыЕсли концентрация CO2 в газовой фазе или в воздухе инкубатора установлена на 5%, количество добавленного NaHCO3 в раствор культуры составляет 1,97 g/l; если концентрация CO2 сохраняется на уровне 10%,количество добавленного NaHCO3 в раствор культуры составляет 3.95 г/л. Крышка бутылки для клеточной культуры не должна быть слишком сильно закручена для обеспечения газообмена;

2Значение pH раствора культуры с использованием буферной пары HCO3 и CO2 нестабильно и имеет тенденцию быть щелочным после хранения в течение определенного периода времени.Если рН жидкости культуры меняется слишком быстро, буфер HEPES может быть добавлен в жидкость культуры до конечной концентрации 10-25 мМ;

3. HEPES является амфотерическим буфером, в основном используемым в биологических исследованиях, таких как окислительная фосфориляция, синтез белка в стерильной среде, фотосинтетическая фосфориляция, фиксация CO2, и т. д.;HEPES не оказывает влияния на субстраты металлоионазы и подходит для передачи в электронной микроскопии (TEM); в клеточных культурах преимущество заключается в том, что он может поддерживать относительно постоянное значение pH во время открытой культуры или наблюдения за клетками.или в виде добавления бикарбонатного буфера (10-15mM) для облегчения ограничения окружающей среды культуры с высокой концентрацией CO2Растворенный СО2 и бикарбонат также очень важны для хорошего роста клеток.