Вы должны знать это знание о porcine трипсине

Что трипсин

Трипсин (C6H15O12P3) вид протеазы. В позвоночных животных, он действует как пищеварительный фермент. В панкреасе, он синтезирован как прекурсор энзима trypsinogen. Он сделан секретным как компонент поджелудочного сока и разложен в активированный трипсин под ограничением enterokinase или трипсина. Это эндопептидаз который может отрезать карбоксильную сторону выпарок лизина и аргинина в цепи полипептида. Оно не только действует как пищеварительный фермент, но также ограничивает декомпозицию прекурсоров других энзимов как chymotrypsinogen, карбоксипептидаза, и фосфолипаза, и имеет активируя влияние. Это самая специфическая протеаза, и это было непременным инструментом в определять последовательность аминокислоты протеина.

Введение porcine трипсина

Относительная молекулярная масса porcine trypsinogen около 24 000. Согласно разнице в изоэлектрическом пункте, porcine trypsinogen можно разделить в анионное (pl6.8<6>). Потому что катионоактивный тип не только имеет более большой удельный вес, но также имеет лучшую стабильность чем анионный тип, катионоактивное porcine trypsinogen было выбрано для конструкции и выражения. Porcine trypsinogen содержит 12 цистеина, который могут сформировать 6 пар скреплений дисульфида (30-160, 48-64, 132-233, 139-206, 171-185, 196-220), которые значительно увеличили затруднение denaturation и renaturation тел включения в последующих экспериментах.

Применение porcine трипсина

Porcine трипсин вид трипсина, могущие понадобиться как добавка для удаления поверхностных адэрентных клеток, продукции вакцин вируса гриппа, инсулина и других протеинов, быстрого гидролиза протеинов, и pretreatment животных клеток и тканей. Большое требование для трипсина с особой чистотой и сильной деятельностью. В настоящее время, был установлен процесс подготовки рекомбинатное porcine trypsinogen, и полученный рекомбинатный porcine трипсин имеет хорошую протеиновую активность и не содержит другое животное загрязнение источника, которое обеспечивает некоторую экспириментально основу для индустриализированных исследования и продукции.

Характеристики porcine трипсина

Porcine трипсин неустойчив в природе и прональн к автолизу. Строя рекомбинатную porcine trypsinogen систему выражения, эта особенность автолиза сделает ее трудным для eukaryotic системы выражения получить полное trypsinogen, и активированный продукт повлияют на хозяина. Клетки могут также быть токсическими, поэтому рассматривайте выбрать prokaryotic систему выражения. К тому же, характеристики автолиза требуют, что условия активации porcine trypsinogen также строго быть проконтролированным.

Метод подготовки porcine трипсина

В традиционном методе подготовки, много шаги разъединения и очищения и долгое время, которое легко для того чтобы причинить повреждение к протеину и инактивированию причины. Приводить в низком выходе. Поэтому, подготовка и продукция porcine трипсина постепенно переносили от извлечения от животного панкреаса к рекомбинатной продукции выражения. Продукция трипсина путем строить рекомбинатную porcine trypsinogen-производную систему выражения Escherichia Coli может также избежать риска родственного загрязнения патогена и риска носить неизвестные вирусы должные к животному происхождению дарителя.