Метод и применение конфигурации буфера Tromethamine Tris ПЭ-АШ 10

Преимущества и недостатки метода и применения конфигурации буфера Tris

Китайское название продукта Tris aminomethane tris (оксиметильное); tromethamine; tromethamine; 2 amino-2- (оксиметильного) - 1,3-propanediol. Это белые кристалл или порошок. Soluble в этаноле и воде, немножко soluble в этиловом эфире уксусной кислоты и коксобензоле, въедливые к медным и алюминиевым, и раздражая химикатам.

Tris имеет высокую емкость буфера, высокую растворимость в воде, и инертно к много ферментационных реакций, делая Tris очень удовлетворительный буфер для много биохимических целей. Вообще использовал для того чтобы стабилизировать пэ-аш системы реакции, с сильной амортизируя емкостью между пэ-аш 7.5-9.0.

Преимущества буфера Tris:

①Потому что основание Tris сильно алкалическо, эту систему буфера можно использовать для подготовки буферов с широким диапазоном значений пэ-аш выстраивая в ряд от кислотного к алкалическому;

②Оно имеет меньшее взаимодействие к биохимическому процессу, и не осаждает с кальцием, ионами магния и ионами тяжелого метала.

Недостатки буфера Tris:

①Пэ-аш буфера значительно повлиян на концентрацией решения, буфер разбавлен 10 времен, и изменение пэ-аш больше чем 0,1;

②Влияние температуры большое, и изменение температуры имеет большее влияние на значении пэ-аш буфферного разрешения проблемы, △pKa/℃=-0.031, например: пэ-аш буфферного разрешения проблемы на 4℃=8.4, тогда pH=7.4 на 37℃, поэтому ем должен быть подготовить на температуре пользы. Буфер Tris-HCl подготовленный на комнатной температуре нельзя использовать на 0℃~4℃;

③Легко поглотить СО2 в воздухе, поэтому подготовленный буфер должен плотно быть загерметизирован;

④Этот буфер имеет некоторое влияние взаимодействия на некоторых электродах пэ-аш, так электрод совместимый с решением Tris должен быть использован.

Метод конфигурации буфера Tris:

2 пути подготовить буфер Tris-HCl: подготовьте решения HCl 0,05 mol/L Tris и 0,05 mol/L соответственно, и после этого смешивание согласно томам перечисленным в общей таблице. Однако, потому что стандартная концентрация разбавляет хлористо-водородная кислота не легка для подготовки, другой метод обыкновенно использована: Примите конфигурации 1 l буфер Tris-HCl 0,1 mol/L в качестве примера: во первых весьте основание 12,11 g Tris и растворить в 950 воде mL~970 деионизированной mL, пока шевелящ, добавьте HCl 4 n dropwise, используйте ph-метр для того чтобы измерить значение пэ-аш решения к пожеланному значению пэ-аш, и после этого добавьте воду для того чтобы составить до 1 L.

Ряд пэ-аш буфера Tris:

Буфер Tris широко используемый буфер в биохимическом исследовании. Свой обыкновенно используемый эффективный ряд пэ-аш в «нейтральном» ряде, как:

Буфер Tris-HCl: pH=7.5~8.5

буфер Tris-фосфата: pH=5.0~9.0

Применение буфферного разрешения проблемы Tris:

В буфере электрофореза, оно формирует систему буфера с глицином для того чтобы стабилизировать пэ-аш; использует систему буфера Tris-HCl в геле для того чтобы стабилизировать пэ-аш; он широко использован как растворитель для нуклеиновых кислот и протеинов; низкую ионную прочность буфера Tris можно также использовать для образования струнцов промежуточных волокон; добавьте ЭТИЛЕНДИАМИНТЕТРАЦЕТАТ к буферу хлористо-водородной кислоты Tris для того чтобы сделать «буфер TE», могущие понадобиться для стабилизации ДНК и хранения; измените пэ-аш-регулируя кислый раствор на укусную кислоту для того чтобы получить «буфер TAE», замените его с борной кислотой доступна как буфер TBE. Эти 2 буфера часто использованы в нуклеиновых кисловочных экспериментах по электрофореза.