Буфферные разрешения проблемы CAS 5625-37-6 хорошие ПУСКАЮТ кислоту по трубам Piperazine-1,4-Diethanesulfonic

Полное название буфера PIPES - пиперазин-1,4- диатансульфоновая кислота, вещество, которое может поддерживать pH раствора в определенном диапазоне.Когда определенное количество кислоты и щелочи добавляется в некоторые растворы, он препятствует изменению рН раствора, что называется буферизацией.биологический буферТакой раствор называется буферным раствором. PIPES является важным членом буфера Goods. Буфер Goods - это буферная система, посвященная исследованиям в области наук о жизни.который не участвует и не вмешивается в биохимические процессы.
 
Основная информация
 

 
Применение ПИПЕС
 
Он не может образовывать стабильные комплексы с большинством ионов металлов и подходит для буфера в растворной системе, содержащей ионы металлов.Он применялся для очистки тубулина с помощью фосфороцеллюлозной хроматографии.Очищенные рекомбинантные белки ARF1 и ARF2, связывающие GTP, были очищены гелевой фильтрацией и использованы в качестве буфера для кристаллизации кетоэнзима из E. coli.потому что PIPES может образовывать свободные радикалы, он не подходит для окислительной системы.В катионообменной хроматографии следует использовать низкую концентрацию буферного раствора PIPES, поскольку PIPES имеет относительно высокую ионную прочность, а его значение pKa зависит от концентрации..
 

Буфер ПИПЕС
 
Преимущества ПИПЕС
 
Чистота (> 99%) растворима в воде, процесс стабилен, а внешний вид продукта может быть гарантирован как чистый белый кристаллический порошок.
 
Пиперазин дитансульфоновая кислота PIPES имеет различные буферные системы,из которых буферный раствор Transformation Buffer (также называемый раствором ТБ) может быть использован для подготовки высокоэффективных компетентных клеток.
Competent state refers to a special physiological state in which cells (or bacteria) can take up DNA molecules from the surrounding environment and are not easily broken down by restriction endonucleases in the cellНекоторые бактерии обладают естественной компетентностью, например, Bacillus subtilis, а некоторые - искусственной, например, Escherichia coli.Обработка клеток-реципиентов специальным методом может изменить проницаемость клеточной мембраны, что делает его компетентной клеткой, которая позволяет молекулам-носителям с чужой ДНК проходить через нее.
Приготовление буфера трансформации:
 

Для преобразования компетентных бактериальных клеток используется метод хлорида кальция.37 градусов за ночь, пока не вырастет одна колония.Выберите колонию диаметром 1-3 мм, чтобы привить SOB в 250 мл / 3 л колбе Эрленмайера или 80 мл / 1 л колбе Эрленмайера. Инкубируйте при 18 градусах при 150-250 оборотах в минуту в течение 19-50 ч.Прекратите культуру, когда OD600 приблизится к 0.4-0.8, охладить в 4 градусов ледяной воды в течение 10 минут, центрифугировать при 300 оборотах в минуту в течение 15 минут, восстановить бактерии после удаления наднаселения, суспендировать в 1/3 объема ледяного раствора туберкулеза,и снова центрифугировать в течение 10 минут, чтобы восстановить бактерии. суспендировать с объемом 1/12,5 ТБ, добавить DMSO с конечной концентрацией 7%, а затем охладить в течение 10 минут в аликвотах 0,1-1 мл и хранить непосредственно в жидком азоте или при температуре -80°C.
 

Опаковка продукта
В растворе туберкулеза из суспендированной кишечной палочки Escherichia coli основные компоненты включают буфер PIPES и хлорид кальция для преобразования клеток в компетентные.Следует отметить, что этот метод подходит для E. штаммы кишечной палочки, которые не содержат плазмиды, и не подходят для больших плазмид. эффективность трансформации может быть снижена после криоконсервации.оптимальная доза 600 различных штаммов бактерий также отличается, и необходимо корректировать в соответствии с различными экспериментами.
Существует множество методов подготовки компетентных клеток с туберкулезом, и эффективность различных методов может отличаться, а применимые штаммы или типы клеток также могут отличаться.Буфер ПИПЕСПродукт Desheng представляет собой порошкообразующий реагент, и соответствующие растворы ТБ могут быть приготовлены в соответствии с различными потребностями.