Почему буфер HEPES 7365-45-9 используется при обнаружении лактатной дегидрогеназы

Лактат- дегидрогеназа (LDH), как один из ключевых ферментов внутриклеточного гликолиза, подвергается изменениям в своей активности при различных патологических условиях.Точное измерение активности ЛДГ имеет большое значение не только для фундаментальных научных исследованийВыбор подходящего буфера является одним из ключевых факторов для обеспечения точности результатов испытаний в этом процессе.

4-гидроксиэтилпиперазинэтаносульфоническая кислота (Буфер HEPES), как широко используемый биологический буфер, постепенно становится основным компонентом наборов для обнаружения лактатной дегидрогеназы.В этой статье будет подробно проанализировано с разных точек зрения, почему буфер HEPES используется при обнаружении лактатной дегидрогеназы.

Буфер HEPES

1Основные характеристики HEPES

HEPES представляет собой звиттерионный буфер, содержащий амино- и карбоксильные группы, с молекулярной формулой C8H18N2O4S. Это слабощелочный, нетоксичный,и без запаха твердые вещества с хорошей растворимостью в воде и химической стабильностью.

Диапазон буферизации HEPES находится между pH 6,8 и 8.2, и для обнаружения LDH его каталитическая среда обычно находится в пределах этого диапазона pH.HEPES может эффективно поддерживать стабильность условий реакции и обеспечивать точность измерения активности ферментаКроме того, на буферную способность HEPES не влияет концентрация CO2, что особенно важно для клеточной культуры и биохимических реакций в открытой среде.

2Применение HEPES при обнаружении LDH

HEPES, как один из основных компонентов набора для обнаружения лактатной дегидрогеназы, выполняет несколько функций.с реагентом I, содержащим биологический буфер HEPES, металлоионный комплекс, субстрат реакции LDH, поверхностно-активный вещество, активировщик фермента LDH, консервант и вода; Реагент II состоит из HEPES, никотинамида аденоина динуклеотида окисленного NAD +, поверхностно-активного вещества,консервантДобавляя различные функциональные компоненты отдельно, можно лучше контролировать условия реакции и уменьшить помехи, вызванные мутностью самого образца.

3, Улучшить точность и эффективность обнаружения

Хорошая стабильность: эффект буферизации, обеспечиваемый HEPES, обеспечивает стабильность pH на протяжении всего процесса обнаружения, что имеет решающее значение для измерения активности ферментов.

Высокая точность: оптимизация формулы и применение строгих мер контроля качества обеспечивают постоянные результаты для каждого испытания.

Широкий диапазон линейных испытаний: способен охватывать широкий диапазон уровней активности LDH, адаптироваться к различным типам образцов и удовлетворять различным клиническим потребностям.

Сильная способность к противодействию помехам: эффективно сопротивляется влиянию внешних факторов, таких как изменения температуры или примеси примеси, обеспечивая подлинность данных.

Не требуется предварительное разведение: упрощает экспериментальные этапы, сокращает время обнаружения, особенно подходит для занятой клинической среды.

4Принцип реакции и измерение

Процесс LDH-катализированного редуцирования пирувиновой кислоты в L-молочную кислоту является обратимой реакцией, и когда концентрация молочной кислоты высока, она способствует обратной реакции, то естьсинтез пирувиновой кислоты из молочной кислотыПри подходящих условиях pH, поддерживаемых в буфере HEPES, L-молочная кислота вступает в реакцию с NAD+ для получения пирувиновой кислоты и NADH. NADH проявляет характерную абсорбантность на длине волны 340 нм,что означает, что активность LDH может быть количественно определена путем мониторинга изменений в абсорбции..

Опаковка продукта

Hubei Xindesheng Material Technology Co., Ltd специализируется на производстве высококачественных гепа и другихбиологические буферные агентыНаша профессиональная техническая команда обеспечивает качество продукции и также может предоставить индивидуальные решения для своевременных послепродажных проблем.Пожалуйста, нажмите на официальный сайт для получения дополнительной информации или свяжитесь со мной.!